欧美人妻aⅴ中文字幕-999zyz玖玖资源站永久-国产av无码专区亚洲av毛网站-亚洲人成人网站18禁

當前位置:主頁 > 技術文章 > 四種細胞破碎的方法

四種細胞破碎的方法

更新時間:2019-10-10 點擊次數:16166

一、機械破碎法:是指利用搗碎機、研磨器或勻漿器 等將細胞破碎開來 。


1. 高速組織搗碎:將材料配成稀糊狀液,放置于筒內約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調速器先撥至慢處,開動開關后,逐步加速至所需速度。此法適用于動物內臟組織、植物肉質種子等。


2. 玻璃勻漿器勻漿:先將剪碎的組織置于管中,再套入研桿來回研磨,上下移動,即可將細胞研碎,此法細胞破碎程度比高速組織搗碎機為高,適用于量少和動物臟器組織。


二、物理破碎法:指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細胞破碎開來。


1.用一定功率的超聲波處理細胞懸液,使細胞急劇震蕩破裂(借助超聲的震動力破碎細胞壁和細胞器)。
機制:可能與強聲波作用溶液時,氣泡產生、長大和破碎的空化現象有關,空化現象引起的沖擊波和剪刀力使細胞裂解。
超聲波破碎的效率取決于聲頻、聲能、處理時間、細胞濃度和細胞類型等。(使用時注意降溫,防止過熱)。


2. 高壓破碎:細胞懸浮液從高壓室的環狀隙噴射到靜止的撞擊環上,被迫改變方向經出口管流出。此過程中細胞經歷了高速造成的剪切的碰撞及高壓到常壓的變化,從而破碎釋放內含物。
這是一種溫和的、*破碎細胞的較理想的方法。


3. 反復凍融法:將細胞在-20度以下冰凍,室溫融解,反復幾次,由于細胞內冰粒形成和剩余細胞液的鹽濃度增高引起溶脹,使細胞結構破碎。


三、化學破碎法:指利用甲醛、丙酮等有機溶劑或表面活性劑作用于細胞膜,使細胞膜的結構遭到破壞或透性發生改變 。


有些動物細胞,例如腫瘤細胞可采用十二烷基磺酸鈉(SDS)、去氧膽酸鈉等細胞膜破壞。濃度一般為1mg/ml。


四、酶學破碎法 :選用合適的酶,使細胞壁遭到破壞,進而在低滲溶液中將原生質體破碎開來。
細菌細胞壁較厚,可采用溶菌酶處理效果更好。
裂解液標準配方: :50mM Tris-HCl(pH8.5~9.0), 2mM EDTA, 100mM NaCl, 0.5% Triton X-100, 1mg/ml溶菌酶。(溶菌酶在這個pH范圍內比較好發揮作用) 。


綜合敘述:無論用哪一種方法破碎組織細胞,都會使細胞內蛋白質或核酸水解酶釋放到溶液中,使大分子生物降解,導致天然物質量的減少,加入二異丙基氟磷酸(DFP)可以抑制或減慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入PMSF也能清除蛋白水解酶活力,但不是全部,而且應該在破碎的同時多加幾次;另外,還可通過選擇pH、溫度或離子強度等,使這些條件都要適合于目的物質的提取。

掃一掃,加微信

版權所有 © 2025北京來亨科學儀器有限公司
備案號:京ICP備2024080360號-1 技術支持:化工儀器網 管理登陸 sitemap.xml

主站蜘蛛池模板: 亚洲国产激情一区二区三区| 免费看a级肉片| 日韩亚洲av无码一区二区三区| 三人弄娇妻高潮| 精品无码国产污污污免费网站 | 国产一区二区三区免费观看在线 | 亚洲av无码久久忘忧草| 大地资源中文在线观看免费| 九九综合va免费看| 国产理论剧情大片在线播放| 色先锋资源久久综合5566| 99久久精品无码一区二区毛片 | 国产gay男性奴视频网站| 精品国产sm捆绑最大网免费站| 国产精品亚洲片在线| 熟女人妇 成熟妇女系列视频| 国产啪亚洲国产精品无码| 绝色教师美妇沉沦为玩物| ā片在线观看免费观看| 99国产精品久久久蜜芽| 99久久伊人精品综合观看| 伊人情人综合网| 天天综合网网欲色| 男女性杂交内射妇女bbwxz| 狠狠综合久久综合88亚洲| 中文字幕乱码人妻综合二区三区| 国农村精品国产自线拍| 又爽又高潮的bb视频免费看| 精品国产性色无码av网站| 欧美性20hd另类| 国产性生交xxxxx免费| 成人一区二区免费视频| 精品熟女少妇av免费久久| 娇妻被打开双腿灌满白浆一区 | 少妇被男按摩师按到高潮| 国产精品免费无遮挡无码永久视频| 国产丝袜肉丝视频在线| 亚洲国产成人无码av在线| 欧美老熟妇xb水多毛多| 性色av无码免费一区二区三区| 国产情侣久久久久aⅴ免费|